欢迎访问联硕生物官网!
购物车内有 0 件物品
ELISA实验的这些技巧
来源于:欧冠体育【中国】有限公司官网,浙江联硕生物科技有限公司 | 发布时间:2023/12/28 17:29:00

特点:

1.高效、灵敏、特异的抗体。

2.稳定的重复性和可靠性。

3.吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体。

4.适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等多种标本类型。

5.节省实验经费。

 

操作方法

1.标准品的稀释,请按照说明书进行操作。

2.根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。

3. 加样:不规范的移液操作可能带来误差。

1)空白孔,空白对照孔不加样品,生物素标记的抗NE抗体,链霉亲和素-HRP,只加显色剂A&B和终止液,其余各步操作相同;

2)标准品孔:加入标准品50ul,链霉亲和素-HRP50ul(标准品中已事先整合好生物素抗体,故不加);

3)待测样品孔:加入样本40ul,然后各加入抗NE抗体10ul、链霉亲和素-HRP50ul,盖上封板膜,轻轻震荡混匀,37℃温育60分钟。

4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6. 显色:每孔先加入显色剂A50ul,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。

7. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

8. 测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后10分钟以内进行。

9. 根据标准品的浓度及对应的OD值计算出标准曲线的直线回归方程,再根据样品的OD值在回归方程上计算出对应的样品浓度。也可以使用各种应用软件来计算。

相关免疫学技术